酶標檢測儀單波長與多波長應(yīng)用解析原理

作者：admin 時間：2021-06-15 01:18:09 點擊次數(shù):1449

　         酶標檢測儀的波長應(yīng)用解析原理。當酶標檢測儀采用單波長測量吸光度時，除了測量過程中的內(nèi)源干擾(包括噪聲、漂移、電壓等)外，液體的表面張力也會對其產(chǎn)生較大的影響。在檢測過程中，由于液體表面的表面張力，液體表面不是平坦的表面，而是凹面，從側(cè)面看像凹透鏡，必然會影響光路的正常通過。由于液體表面的凹面的影響，當光線通過液體表面時，除了一部分通常被液體吸收外，還有一部分被折射和反射(如光線通過凹透鏡)，這就影響了吸光度的檢測。微孔板閱讀器使用點光源，通過光纖。如果每次都能在同一位置檢測到，就保證了吸光度的重復性。然而，由于機械運動引起的誤差，不可能保證每個孔都在相同的位置。部分被檢測到，所以孔與孔之間有一定的區(qū)別。
      酶標檢測儀的波長應(yīng)用解析，在雙波長測量中，減少了測量干擾和電路干擾，使測量結(jié)果顯著提高。由于液體表面張力的差異，單波長測量的誤差比較大。另外，使用不同的洗滌劑會影響*后一次添加后的底物和終止液的水平。用添加了表面活性劑的洗滌劑清洗后，產(chǎn)生的液位會更凹，這對單波長檢測有更大的影響。它與表面活性劑的濃度成正比。用中性蒸餾水洗滌后，單波長和雙波長檢測技術(shù)的結(jié)果基本相同。
      酶標檢測儀在酶聯(lián)免疫法測定抗原、抗體中，常用標記酶辣根過氧化物酶所使用的底物一般是鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺，顯色終止后，二者在6 3 0nm 和6 5 5nm處的吸光度值都只在吸收峰處 (4 9 2 n m/4 5 0 nm )吸光度值的 1 %以下，因此，利用雙波長檢測，不會影響檢測的靈敏度。建議在進行酶聯(lián)免疫檢測時，酶標儀比色應(yīng)該首先雙波長。這樣可以提高臨界值處標本的分析準度，減少實驗誤差。

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