酶標(biāo)檢測(cè)儀單波長(zhǎng)與多波長(zhǎng)應(yīng)用解析原理
作者：admin 時(shí)間：2021-06-15 01:18:09 點(diǎn)擊次數(shù):1483
酶標(biāo)檢測(cè)儀的波長(zhǎng)應(yīng)用解析原理。當(dāng)酶標(biāo)檢測(cè)儀采用單波長(zhǎng)測(cè)量吸光度時(shí)，除了測(cè)量過(guò)程中的內(nèi)源干擾(包括噪聲、漂移、電壓等)外，液體的表面張力也會(huì)對(duì)其產(chǎn)生較大的影響。在檢測(cè)過(guò)程中，由于液體表面的表面張力，液體表面不是平坦的表面，而是凹面，從側(cè)面看像凹透鏡，必然會(huì)影響光路的正常通過(guò)。由于液體表面的凹面的影響，當(dāng)光線通過(guò)液體表面時(shí)，除了一部分通常被液體吸收外，還有一部分被折射和反射(如光線通過(guò)凹透鏡)，這就影響了吸光度的檢測(cè)。微孔板閱讀器使用點(diǎn)光源，通過(guò)光纖。如果每次都能在同一位置檢測(cè)到，就保證了吸光度的重復(fù)性。然而，由于機(jī)械運(yùn)動(dòng)引起的誤差，不可能保證每個(gè)孔都在相同的位置。部分被檢測(cè)到，所以孔與孔之間有一定的區(qū)別。
酶標(biāo)檢測(cè)儀的波長(zhǎng)應(yīng)用解析，在雙波長(zhǎng)測(cè)量中，減少了測(cè)量干擾和電路干擾，使測(cè)量結(jié)果顯著提高。由于液體表面張力的差異，單波長(zhǎng)測(cè)量的誤差比較大。另外，使用不同的洗滌劑會(huì)影響*后一次添加后的底物和終止液的水平。用添加了表面活性劑的洗滌劑清洗后，產(chǎn)生的液位會(huì)更凹，這對(duì)單波長(zhǎng)檢測(cè)有更大的影響。它與表面活性劑的濃度成正比。用中性蒸餾水洗滌后，單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)檢測(cè)技術(shù)的結(jié)果基本相同。
酶標(biāo)檢測(cè)儀在酶聯(lián)免疫法測(cè)定抗原、抗體中，常用標(biāo)記酶辣根過(guò)氧化物酶所使用的底物一般是鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺，顯色終止后，二者在6 3 0nm 和6 5 5nm處的吸光度值都只在吸收峰處 (4 9 2 n m/4 5 0 nm )吸光度值的 1 %以下，因此，利用雙波長(zhǎng)檢測(cè)，不會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度。建議在進(jìn)行酶聯(lián)免疫檢測(cè)時(shí)， 酶標(biāo)儀比色應(yīng)該首先雙波長(zhǎng)。這樣可以提高臨界值處標(biāo)本的分析準(zhǔn)度， 減少實(shí)驗(yàn)誤差。
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